培养方瓶使用过程中需要注意哪些事项？

培养方瓶是生物实验和工业生产中常用的容器，主要用于细胞、组织或微生物的体外培养。

其作用涵盖细胞扩增、药物筛选、生物制品生产等多个领域。

预处理：使用前需用75%酒精擦拭或紫外线照射消毒，避免残留消毒剂影响细胞生长。

传代操作：贴壁细胞需用胰蛋白酶消化后分瓶，悬浮细胞直接离心重悬即可。

气体控制：根据细胞类型调整CO₂浓度(如5% CO₂用于哺乳动物细胞)，避免pH波动。

避免污染：操作时需在超净工作台内进行，瓶口勿直接接触非无菌物品。

储存条件：未使用的预灭菌方瓶需密封保存于干燥环境，避免受潮或破损。

疫苗生产：在方瓶中培养Vero细胞，接种脊髓灰质炎病毒，收获病毒后灭活制成疫苗。

CAR-T细胞制备：在方瓶中扩增患者T细胞，通过慢病毒转染导入CAR基因，回输体内治疗肿瘤。

干细胞研究：在3D培养方瓶中诱导多能干细胞分化为心肌细胞，构建疾病模型。